发布时间:2023-04-01 03:17
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1,为什么浓缩的时候调到跑到分离胶了
的PH值不同,前者主要表现为浓缩效用,后者表现为电荷效用和分子筛效用。 浓缩效应主要在浓缩胶中完成,浓缩胶的pH6.8 ,在这个pH条件下,缓冲液中的HCl的在浓缩胶中,其ph环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而cl离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压梯度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带。当样品进入分离胶后,由于胶中ph的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。2,为什么浓缩胶具有浓缩作用啊实验的思考题求大神解答
浓缩胶的作用是有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带。当样品液和浓缩胶选pH6.8的TRIS/HCL缓冲液,电极液选TRIS/甘氨酸。电泳开始后,HCL解离成氯离子,甘氨酸解离出少量的甘氨酸根离子。蛋白质带负电荷,因此一起向正极移动,其中氯离子最快,甘氨酸根离子最慢,蛋白居中。电泳开始时氯离子泳动率最大,超过蛋白,因此在后面形成低电导区,而电场强度与低电导区成反比,因而产生较高的电场强度,使蛋白和甘氨酸根离子迅速移动,形成以稳定的界面,使蛋白聚集在移动界面附近,浓缩成一中间层。大大提高了电泳的灵敏度。参考答案:http://baike.baidu.com/view/3335221.htm优质文章排行榜